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Revista Pan-Amazônica de Saúde

versão impressa ISSN 2176-6215versão On-line ISSN 2176-6223

Rev Pan-Amaz Saude v.1 n.1 Ananindeua mar. 2010

http://dx.doi.org/10.5123/S2176-62232010000100019 

ARTÍCULO ORIGINAL

 

Bacterias aisladas de culícidos (Diptera: Nematocera) hematófagos en Belém, Pará, Brasil*

 

 

Willy Cristiano Luz AlvesI; Inocêncio de Sousa GorayebII; Edvaldo Carlos Brito LoureiroIII

IUniversidade Federal do Pará, Belém, Pará, Brasil
IIMuseu Paraense Emílio Goeldi, Belém, Pará, Brasil
IIIInstituto Evandro Chagas/SVS/MS, Ananindeua, Pará, Brasil

Endereço para correspondência
Correspondence
Dirección para correspondencia

 

Título original: Bactérias isoladas de culicídeos (Diptera: Nematocera) hematófagos em Belém, Pará, Brasil. Traducido por: Rocio Tamara (resumen) y Lota Moncada (artículo)

 

 


RESUMEN

Las bacterias son abundantes en la naturaleza, participan de la flora y de la fauna animal, y algunas causan enfermedades. Tienen su distribución ampliada, cuando son transportadas por un vector. Los Díptera de la familia Culicidae, son vectores de epidemias de gran interés para la salud pública, sin embrago, la asociación entre las bacterias y los culícidos ha sido poco abordada. Para avanzar en el conocimiento sobre este tema, se propuso aislar e identificar las bacterias que son transportadas por los culícidos hematófagos en Belém, Pará. La captura de los culícidos se realizó con una trampa de luz de tipo CDC, en 8 puntos de colecta en el área metropolitana de Belém, que presentan distintas características ambientales. Fueron recogidas 296 muestras de culícidos, algunos de los cuales fueron identificados a nivel de especie (9) y otros para subgénero (4). De estas muestras se identificaron 17 especies de bacterias, otras 7 fueron identificadas sólo a nivel de género. Culex quinquefasciatus y Anopheles aquasalis que fueron los más abundantes entre los culícidos. Las especies de bacterias Gemella haemolysans y Enterobacter cloacae fueron las más abundantes en las muestras. Los puntos de colectas se ubicaron en los barrios de Terra-Firme y Curió-Utinga, que fueron los que presentaron la mayor diversidad de especies de culícidos.

Palavras clave: Bactérias; Culicidae; Transporte Biológico; Ecosistema Amazônico.


 

 

INTRODUCCIÓN

El orden Diptera, que incluye las moscas y mosquitos, posee cerca de 150 mil especies, y es la cuarta más grande de la clase Insecta. Sus miembros ocupan varios nichos en diferentes hábitat aéreos, acuáticos y terrestres. El orden Diptera posee diversas familias de importancia médica incluidas en el suborden Nematocera (Culicidae, Ceratopogonidae, Simuliidae y Psychodidae). En Brasil estás descriptas aproximadamente 20 mil especies de dípteros en cerca de 100 familias que han sido indicadas en el Catalogue of the Neotropical Region42, aun no completado. La fauna de dípteros en Brasil todavía es poco conocida, y se cree que sea cerca de dos a tres veces más grande de lo que está registrado8.

Se reconoce mundialmente la existencia de cerca de 3.600 especies en la familia Culicidae. Están distribuidas en aproximadamente 40 géneros, siendo el área neotropical la que detenta un mayor nivel de endemismo, una vez que 27% des esos grupos están restrictos a esa región biogeográfica. La fauna de culícidos de la Amazonía es poco conocida, el último trabajo sobre la distribución de mosquitos, abarcando toda la Región Amazónica fue realizado en 19619 y reúne a 218 especies, con 152 en el Estado de Pará51. Los mosquitos constituyen un grupo grande, que contiene muchos géneros y especies, pero, desde el punto de vista humano, los géneros más importantes son los Anopheles, Aedes y Culex.

Hay pocos trabajos publicados en el mundo sobre la relación entre bacterias y dípteros, y menos aún, sobre bacterias y culícidos. Apenas en los últimos diez anos empezaron a aparecer investigaciones sobre esa relación, y a ganar importancia en el medio científico. Han sido identificadas bacterias en el tracto digestivo de varias especies de insectos, constituyendo la microbiota intestinal40. Estudios realizados con mosquitos criados en insectarios en México20 y en Brasil24 evidenciaron la prevalencia de bacterias Gram negativas en sus intestinos. Algunas bacterias están siendo utilizadas como control biológico   de   insectos   adultos   y   larvas   en plantaciones13,49,5,50, otras están siendo probadas como alternativa en el control de poblaciones de mosquitos que causan epidemias43,30,14,3. Algunas otras investigaciones están evaluando la asociación entre las bacterias con vectores mecánicos, con posibilidad de transmisión por diversos insectos31,41,11,37,44. En estudio realizado en 200731, fueron aisladas de tabánidos, más de 20 especies de bacterias, sobre todo pertenecientes a los géneros Staphylococcus, Streptococcus y Serratia.

Poblaciones de mosquitos que causan epidemias43,30,14,3. Algunas otras investigaciones están evaluando la asociación entre las bacterias con vectores mecánicos, con posibilidad de transmisión por diversos insectos31,41,11,37,44. En estudio realizado en 200731, se aislaron de tabánidos, más de 20 especies de bacterias, sobre todo las pertenecientes a los géneros Staphylococcus, Streptococcus y Serratia.

El proceso de organización de las ciudades contribuye a la distribución de las especies de dípteros. Ambientes más habitados seleccionan las especies con mayor poder de adaptación a estos locales, mientras que los lugares en donde hay más arbolado y menos influencia humana, seleccionarán otras especies de dípteros. Y así, los dípteros son separados en nichos dentro de una misma ciudad. Los agentes que esos dípteros transportan también son muy variados y tratándose de bacterias, poco se puede afirmar sobre su papel en esta problemática. Hay pocas líneas de investigación sobre esta temática en Brasil y es necesario que sean creadas otras, en pro del avance del conocimiento. El objetivo principal es evaluar la diversidad entomológica y bacteriológica asociada a áreas urbanas distintas en la Ciudad de Belém.

 

METODOLOGÍA

ÁREA DE ESTUDIO

En la Ciudad de Belém se seleccionaron siete puntos de colecta, con características distintas en términos de urbanización. Otro punto fue seleccionado en un área próxima al margen del estuario del río Pará, localizado en el Distrito Administrativo de Outeiro, en Belém.

Centro de Belém

Área del centro urbano de Belém, que se caracteriza por tener muchas casas y edificios, pocas áreas de suelo descubierto, muchas áreas cementadas y asfaltadas, vegetación restringida a los patios y a la ornamentación florística de la ciudad. Los puntos de colecta seleccionados se localizan en los barrios de Cremação y Nazaré.

Pericentro de Belém

Área de Belém caracterizada por muchas casas y pocos edificios, con áreas de suelo al descubierto, con poco cemento y asfalto. Más vegetación en los patios y menos vegetación ornamental. Los locales de colecta seleccionados se localizan en los barrios de Curió-Utinga y Jurunas.

Periferia de Belém

Área con pocas casas y sin edificios, casas alejadas entre sí por predios vacíos. Suelo sin cemento ni asfalto, mucha vegetación en los terrenos deshabitados y en los patios, además, hay trechos de selva. Los puntos de colecta seleccionados se localizan en los barrios de Tapaná, Terra Firme e Icoaraci.

Áreas de Estuario

Las varzeas del estuario del río Pará constituyen un ecosistema distinto, con características bióticas y abióticas propias. Las especies de insectos hematófagos y sus relaciones con las bacterias, también deben presentar aspectos especiales. Se realizaron colectas en el estuario del río Pará en Outeiro.

COLECTA DE CULÍCIDOS

Los insectos fueron colectados en el período de mayo de 2007 a abril de 2008, siempre entre las 17 h y las 22 h o hasta las 6 h del día siguiente. Las colectas se realizaron con técnica apropiada para minimizar la contaminación de las trampas y los recipientes para la colecta de los culícidos.

Fueron utilizadas trampas luminosas del tipo CDC47, que son usualmente utilizadas para muestreo de insectos hematófagos (principalmente culícidos, flebotomíneos y ceratopogónidos). Atraen los insectos a una pequeña fuente de luz de tungsteno. Cuando estos pequeños insectos se aproximan de la luz, son aspirados para el interior de la trampa por un pequeño ventilador que funciona accionado por una corriente de 12 V. Los insectos colectados por este método permanecen vivos hasta que son retirados.

IDENTIFICACIÓN DE LOS CULÍCIDOS

Los culícidos, son llevados, inmediatamente después de colectados, al Departamento de Arbovirología del Instituto Evandro Chagas (IEC), Belém, Pará y, con la participación de especialistas, fueron identificados utilizándose para tal claves de identificación de tres artículos clásicos en taxonomía de Culicidae: Foranttini19, Gorham et al21  y Faran y Finthicum17.

IDENTIFICACIÓN DE LAS BACTERIAS

Luego de su identificación, los mosquitos fueron sometidos a los tratamientos para la investigación de bacterias.

De acuerdo al número de ejemplares de mosquitos colectados de cada especie, fueron separados en grupos (pools). Se estudiaron un total de 41 pools con tres ejemplares y seis pools con dos ejemplares, totalizando 129 culícidos. Hubo necesidad de utilizar, en algunos casos, pools con dos ejemplares por causa de la insuficiencia de ejemplares colectados de una determinada especie.

Para la formación de los pools los mosquitos fueron separados asépticamente (próximo a un pico de Bunsen) utilizando cabina de seguridad biológica. En ninguna etapa de la investigación hubo manipulación directa de los ejemplares de culícidos, ya que éstos estaban acondicionados individualmente en tubos de ensayo, lo que facilitó la identificación y disminuyó las fuentes de contaminación.

Después de la definición e identificación de los grupos, fueron triturados en solución fisiológica estéril. En seguida se retiró una alícuota que fue inoculada en dos medios de cultivo, el Tryptic Soy Broth (TSB) y el Tioglicolato de sodio, por 24 h a 37° C.

Una alícuota del material contenido en los tubos de TSB y Tioglicolato en donde se verificó crecimiento (enturbiamiento), fue sembrada en los siguientes medios de cultivo: agar sangre, agar sangre en 5 a 10% de CO2, agar Chapman y agar MacConkey, y posterior incubación a 37° C por 24 h.

Las colonias crecidas en agar sangre y agar Chapman fueron sometidas a bacterioscopía por el método de Gram y posterior identificación de los cocos y bacilos Gram positivos28. Tres a cinco colonias de agar MacConkey fueron sembradas en medio de selección TSI (triple azúcar e hierro) y posterior identificación bioquímica de los bacilos negativos por el método de Gram15,25.

Para la caracterización bioquímica se utilizó también el sistema ID 32 E, API 20 E, API 50 CH, API Staph, API Corine y API 20 Strep, a través del aparato Mini API da Bio - Mérieux, Francia. El control de calidad de los kits para las determinaciones bioquímicas se realizó, utilizando las siguientes muestras estándar: E. coli ATCC-25922, P. aeruginosa ATCC-27853 y S. Aureus ATCC-25923.

 

RESULTADOS

Fueron colectados 296 culícidos hematófagos durante todo el período de la investigación, pero no todos los ejemplares se usaron para el estudio bacteriológico, solamente 129, que fueron divididos en 41(pools) de tres ejemplares de la misma especie, y tres pools conteniendo dos ejemplares. La mayoría de los culícidos colectados fue identificada a nivel de especie: Culex (Culex) coronator, Anopheles (Nyssorhynchus) triannulatus, Coquillettidia (Rhynchotaenia) venezuelensis, Mansonia (Mansonia) titillans, Culex (Culex) quinquefasciatus, Mansonia (Mansonia) titillans, Aedes (Stegomyia) aegypti, Anopheles (Nyssorhynchus) aquasalis y Psorophora (Janthinosoma) ferox. Otros, sin embargo, fueron identificados solamente a nivel de género: Culex (Culex) spp., Phoniomyia spp. y Culex (Melanoconion) spp.

De todos los culícidos colectados tan sólo Psorophora (Janthinosoma) ferox y Phoniomyia spp. no presentaron crecimiento de bacterias en los medios seleccionados para la identificación. Ejemplares de Anopheles (Nyssorhynchus) aquasalis fueron colectados en el punto de colecta de Outeiro y en el punto de Nazaré, sin embargo, solamente hubo crecimiento bacteriano en los ejemplares del local de colecta de Nazaré.

La especie C. quinquefasciatus fue la más colectada (85 ejemplares), lo que representó un 28,7% del total de culícidos capturados (Figura 1). Se colectaron 42 ejemplares de A. aquasalis y 40 ejemplares de A. aegypti, lo que representó un 14,1% y un 13,5% del total de mosquitos, respectivamente. El punto de colecta de Tierra Firme presentó la mayor cantidad de especies de culícidos; fue posible la identificación hasta el nivel de especie de Coquillettidia venezuelensis, Ochlerotatus serratus y Psorophora ferox. Fueron identificadas hasta el subgénero Culex (Culex) spp. y Trichoprosopon (Trichoprosopon) spp., y hasta el género Phoniomyia spp. El local de colecta de Curió-Utinga también presentó gran cantidad de culícidos, fueron identificados cuatro hasta el nivel de especie y uno hasta el subgénero. En el barrio de Cremação se colectó solamente la especie Culex quinquefasciatus.

 

 

En los culícidos colectados se identificaron 17 especies de bacterias y otras siete que fueron identificadas solamente a nivel de género. Entre las bacterias identificadas hubo un predominio de las especies Gemella haemolysans, Enterobacter cloacae y Enterococcus faecalis (Figura 2), lo que representó un 14,5%, 12,3% y 8,9% del total de bacterias identificadas, respectivamente. El género Staphylococcus (negativo para ensayo de coagulasa) fue identificado en un 10% de las muestras analizadas. La figura 3 ilustra el número de especies de bacterias en cada punto de colecta de los culícidos. Culex quinquefasciatus, Coquillettidia venezuelensis y A. aegypti fueron los tres culícidos que presentaron el más grande número de especies bacterias. No hubo crecimiento bacteriano en los medios de cultivo con ejemplares de Psorophora ferox y Phoniomyia spp.

 

 

 

 

La tabla 1 presenta los resultados obtenidos relacionando las bacterias aisladas a las especies de culícidos. Muestra también la frecuencia de las bacterias en cada especie de culicídeo en los puntos en donde fueron colectados. Se observó que E. cloacae fue encontrada en seis especies (como mínimo) de Culicidae; G. haemolysans y Staphylococcus sp. Se encontraron en cuatro especies (mínimo); B. cereus y Phatoes sp. en tres especies; las demás especies de bacterias fueron encontradas en dos o solamente en una especie de Culicidae. La E.cloacae también fue la especie de bacteria que surgió en más puntos de colecta (cinco barrios); G. haemolysans, Phantoea sp. y Staphylococcus sp. ocurrieron en tres barrios; y las demás en dos o solamente en un barrio. Se observó además que algunas especies de bacterias   presentaron   una   elevada   frecuencia   en determinada especie de culicídeo: G. haemolysans en C. (C.) quinquefasciatus (un 7,82% del total de cepas aisladas e identificadas); Staphylococcus sp. y, Culex (Culex) spp. 6,7%; E. faecalis en C. (C.) quinquefasciatus (6,14%); B. Cereus en Culex (Culex) spp. (5,59%); G. haemolysans en A. (N.) aquasalis (5,02%); Bacillus sp. en Coquillettidia (R.) venezuelensis (4,47%); las demás presentaron tasas por debajo del 4%.

 

 

En la figura 3 se ilustra el número de especies de bacterias en cada punto de colecta de los culícidos. Los puntos de colecta del Curió-Utinga y de Terra-Firme presentaron un número más grande de especies de bacterias. Las más frecuentes en esos puntos fueron, respectivamente: Bacillus cereus (5,59% del total de cepas identificadas) y Gemella haemolysans (7,82% del total de cepas identificadas). Por otro lado, los puntos de colecta de Outeiro y de Icoaraci presentaron apenas dos especies de bacterias, con predominio de Pantoea sp. (2,23% del total de cepas identificadas) en Outeiro y de Enterobacter cloacae (1,67% del total de cepas identificadas) en Icoaraci.

La figura 4 ilustra el número de especies de bacterias encontradas en cada especie de culicídeo. Culex quinquefasciatus, Coquillettidia venezuelensis y A. aegypti fueron los culícidos que presentaron el mayor número de especies de bacterias. No hubo crecimiento bacteriano en los medios de cultivo con ejemplares de Psorophora feroxy Phoniomyia spp.

 

 

 

DISCUSIÓN

Los culícidos están ampliamente asociados a las actividades antrópicas, que ofrecen sitios de oviposición artificiales y permiten la manutención de sus poblaciones. Los centros urbanos se configuran como favorecedores de la dispersión y el aumento de la densidad de los mosquitos, ya que el espacio social organizado influencia la interacción entre el vector, el agente infeccioso y el hombre. Entre las especies de culícidos colectados, C. quinquefasciatus y A. aegypti las especies que presentaron más poder de domicialización.

C. quinquefasciatus se colectó en cinco de los ocho puntos de colecta definidos, confirmando que es una especie que presenta gran poder de dispersión. En un estudio realizado en 1 99145, hembras, inicialmente marcadas, fueron posteriormente recapturadas a 1 Km. del punto de soltura. Este factor es esencial para calificar el potencial de dispersión de esta especie. Lo que puede ser confirmado por las bacterias identificadas en sus muestras, ya que la especie Enterobacter amnigenus fue aislada de muestras de barrios distantes como Cremação e Icoaraci; Pantoea sp. fueron aisladas de muestras de Cremação y Outeiro. Son puntos distantes y con características ambientales distintas, pero que presentaron los mismos vectores y microbiota bacteriana.

Entre los culícidos la especie C. quinquefasciatus fue la más abundante (85 ejemplares), presentó ocho diferentes muestras de bacterias, siendo que la más común fue la especie Enterococcus faecalis (13 ocurrencias). Las hembras adultas de esa especie poseen tendencia a alimentarse con sangre humana10, permitiendo su desarrollo en ambiente urbanizado. Además de provocar molestias a las comunidades que viven próximas a sus criaderos48. C. quinquefasciatus es un vector de varios agentes patógenos al hombre19, lo que lo caracteriza como siendo de elevada importancia en salud pública, justificando su control en áreas infestación.

A. aquasalis es un mosquito tanto encarado como antropofílico, como zoofílico o ecléctico. Es un importante vector de la malaria, del litoral, en diversas localidades de Brasil y las Américas, que viene presentando un comportamiento alimentario bastante variable18. Fueron colectados 42 ejemplares durante dos colectas en el barrio de Nazaré. Solamente se encontró la bacteria Gemella haemolysans en sus muestras.

La especie A. aegypti fue la tercera más colectada (40 ejemplares) durante el período del estudio. Se encontró en los barrios de Jurunas, Tapanã y en el Distrito Administrativo de Icoaraci. Presentó en sus muestras, seis diferentes especies de bacterias, entre ellas, Enterococcus faecalis y Pseudomonas aeruginosa. El mosquito Aedes aegypti es hoy, probablemente, el problema de salud más grave en Brasil, dada su ocurrencia en todos los Estados del País y el hecho de transmitir los virus causadores de tres enfermedades humanas graves: el dengue, el dengue hemorrágico y la fiebre amarilla6.

La Coquillettidia venezuelensis fue colectada en los barrios de Curió-Utinga y Terra-Firme, presentó gran variedad de muestras bacterianas (ocho en total), pero tiene el potencial de transmisión de esos agentes disminuido, por causa de su hábitat, que requiere áreas forestadas. Según Guimarães23, trabajando en áreas de la Serra do Mar del Estado de São Paulo, observaron que las especies de Coquillettidia necesitan de algunos factores para su ciclo de vida, como la presencia de plantas acuáticas para su desarrollo e índice de precipitación pluviométrico elevado. El trabajo de Guimarães23 confirma los resultados de este estudio, pues los barrios en donde la Coquillettidiafue colectada presentan características ideales para su ciclo de vida. A pesar de tener una gran variedad de bacterias, éstas solo pueden causar problemas a las poblaciones que viven en las condiciones ideales para el desarrollo del mosquito.

Entre las bacterias, la Gemella haemolysans fue la más frecuente con un 14,51% del total de cepas identificadas. Estuvo presente en las muestras de A. aegypti, A. aquasalis, Trichoproson spp. y O. serratus. Esa bacteria puede encontrarse normalmente en la cavidad oral, provocando gingivitis u oportunamente causando meningitis, bronquitis y neumonía34,16. Las bacterias del género Gemella fueron el principal hallazgo de Moreira38, cuando las aislaron de hormigas, en hospitales de Rio de Janeiro.

La especie Enterobacter cloacae ocurrió 22 veces en seis muestras de culícidos, lo que representó un 12,28% del total de cepas identificadas. No se encontró apenas en la muestra del punto de colecta del barrio de Jurunas. Normalmente se encuentra distribuida en el agua, cloacas, suelo, vegetales y es parte de la microbiota entérica comensal. Se cree que no causa diarrea y también está asociada a una variedad de infecciones oportunistas que afectan las vías urinarias, el tracto respiratorio, las heridas cutáneas y puede provocar septicemia28. Esa especie también se encontró en estudio desarrollado con cucarachas en Goiânia44. Gouveia et al22 encontraron una prevalencia significativa de E. cloacae en poblaciones distintas de Lutzomyia corroborando lo encontrado en el presente estudio con Culicidae.

Las bacterias del género Staphylococcus coagulase negativa se encuentran ampliamente distribuidas en el medio ambiente y hacen parte de la microbiota nasal, pero también pueden ser encontradas en la cavidad bucal33. Todas las muestras de estafilococos de los culícidos presentaron ensayo negativo para coagulasa, excluyendo la posibilidad de Staphylococcus aureus, que es una de las especies más importantes del género, por estar involucrada en diversas patologías que van desde infección alimentaria33 hasta septicemias16. Los resultados de un estudio reciente desarrollado por Costa11 revelaron que las bacterias del género Staphylococcus, negativas al ensayo de coagulasa, fueron el principal hallazgo de la investigación bacteriológica en hormigas provenientes de hospitales de Minas Gerais, evidenciando su capacidad de ser transportadas por vectores mecánicos.

Enterococcus faecalis fue aislada de C. quinquefasciatus de los locales de colecta de Cremação y Jurunas, y también de A. aegypti del punto de colecta de Jurunas. Representó un 8,93% del total de colonias de bacterias aisladas, siendo más frecuente en las muestras de C. quinquefasciatus del punto de colecta de Cremação (6,14%). Los enterococos son cocos Gram positivos que generalmente se disponen en pares y en cadenas cortas, pueden ser hallados en el suelo, en alimentos, en el agua, en animales, pájaros e insectos. El principal reservorio humano de los enterococos es el tracto gastrointestinal, pero, también puede ser encontrado, con menos frecuencia, en cavidad oral, vesícula biliar, vagina y uretra masculina53. En los últimos años, varios estudios han sido realizados porque los enterococos se tornaron importantes agentes de enfermedades humanas, debido principalmente a su resistencia a agentes antimicrobianos38.

El Bacillus cereus y Bacillus sp. representaron respectivamente 5,59% y 7,26% del total de cepas de bacterias identificadas. B. cereus fue aislado de C. coronator, C. (Culex) spp. y de A. triannulatus capturados en el punto de colecta de Curió-Utinga. Mientras que Bacillus sp. fue aislado de A. triannulatus del punto de colecta de Nazaré y de C. venezuelensis del punto de colecta de Curió-Utinga. El B. cereus es una bacteria Gram positiva, tiene como reservorio natural el suelo. Sin embargo, debido a la resistencia de sus esporas, esta bacteria puede ser aislada de una gran variedad de puntos, estando ampliamente distribuida en la naturaleza. De acuerdo con Mendes et al35 su principal implicación está en la contaminación alimentar, que puede provocar deterioro de los alimentos almacenados y diarrea cuando éstos son consumidos39. Ya el Bacillus sp. está más asociado a contaminación de leche. De acuerdo con Vittoril et al52, ni siquiera los procesos térmicos del beneficio de la leche son capaces de destruir tales bacterias.

Pantoea sp. fue aislada de C. venezuelensis, T. (Trichoprosopon) spp. y C. quinquefasciatus, colectados en los locales de Terra-Firme, Cremação y Outeiro. Su frecuencia fue de un 5,02% del total de cepas identificadas. Las Pantoea sp. son bacilos cortos Gram negativos, normalmente aislados de superficies de plantas, de semillas, del suelo y del agua. Son patógenos oportunistas y por eso pueden estar presentes en heridas, sangre y orina humana26.

Gemella morbillorum fue aislada de C. (Culex) spp. y de Coquillettidia venezuelensis colectados en el local de colecta de Terra-Firme, presentó una frecuencia de 3,91% del total de cepas identificadas. Se trata de una bacteria comensal de la orofaringe, vías aéreas superiores y aparatos urogenital y gastrointestinal, raramente causa infecciones en humanos. Sin embargo, ha sido referido un creciente número de procesos infecciosos en diferentes localizaciones. Abscesos cerebrales provocados por esta bacteria son extremamente raros, se han encontrado apenas cuatro casos previamente descritos en la literatura29.

Pseudomonas aeruginosa fue aislada de A. aegypti y C. quinquefasciatus del punto de colecta de Tapanã, con una frecuencia de 3,35%. Se trata de una bacteria Gram negativa extremamente versátil, que puede ser encontrada en diversos ambientes, principalmente suelo y agua, o aún, asociada a plantas y animales, pudiendo causar infecciones oportunistas. En seres humanos, P. aeruginosa causa infecciones en individuos inmunocomprometidos, como pacientes de SIDA y cáncer, víctimas de quemaduras y portadores de fibrosis cística1. La P. aeruginosa también es frecuentemente encontrada en infecciones hospitalarias, siendo capaz de adherir a diversos materiales, contaminando catéteres, ventiladores, prótesis y lentes de contacto. Por causa del alta resistencia a antibióticos y del gran arsenal de factores de virulencia de esta bacteria, las infecciones causadas por ella son de difícil control4.

Providencia rettgeri y Providencia rustigianii juntas presentaron una frecuencia de 3,91% del total de cepas identificadas. Fueron aisladas, respectivamente, de C. quinquefasciatus capturados en los puntos de colecta de Cremação y Jurunas, y de A. aegypti que fueron colectados en el local de colecta de Tapanã. El género Providencia actualmente está compuesto de cinco especies: P. alcalifaciens, P. stuartii, P. rettgeri, P. rustigianii y P. heimbachae, de las cuales, las cuatro primeras son reconocidas como patógenos humanos. Estas especies son corrientemente asociadas a infecciones del tracto urinario en la comunidad sana y en pacientes con catéter. Pueden causar infecciones oportunistas variadas en pacientes hospitalizados, con quemaduras, lesiones cutáneas, hedidas quirúrgicas y septicemia2.

El género Streptococcus comprende muchas especies de cocos Gram positivos, anaerobios facultativos, comensales y patogénicos que colonizan la piel y membranas mucosas de los tractos respiratorio, genitourinario y canal alimentar de humanos y otros mamíferos32. En este trabajo, fueron aislados e identificados hasta la categoría de especie el Streptococcus mitis y Streptococcus pyogenes, en una tercera cepa no fue posible llegar hasta la especie. El Streptococcus mitis fue aislado de Ochlerotatus serratus colectados en el punto de colecta de Terra-Firme, presentó una frecuencia de 3,35% del total de cepas identificadas. Se trata de una especie predominante en las membranas mucosas y lengua del hombre32. El S. pyogenes presentó una frecuencia de 2,23% y fue aislado de C. venezuelensis capturados en el punto de colecta de Terra-Firme. Esa especie también es conocida como estreptococo beta-hemolítico del Grupo A (SBGA). Es la principal representante de los estreptococos beta-hemolíticos, ha demostrado, a lo largo del tiempo, alto poder de adaptación al hospedero humano, actuando como importante agente etiológico de una serie de manifestaciones clínicas, entre las cuales predomina la orofaringitis32, bien como secuelas no supurativas, representadas por la fiebre reumática y la glomerulonefritis.

La Stenotrophomonas maltophilia fue aislada en dos momentos: de Culex spp. colectados en el local de Curió-Utinga y de Ochlerotatus serratus colectados en el punto de colecta de Terra-Firme. Presentó una frecuencia de 2,24% del total de cepas aisladas e identificadas. Se trata de una bacteria en la forma de bacilo Gram negativo que puede ser encontrada en una gran variedad de ambientes y regiones geográficas, ocupando nichos ecológicos distintos y fuentes múltiples de agua. Otras fuentes de aislamiento incluyen el suelo, detritos, leche cruda, pescado congelado, huevos y carcasa de animales46. En el ambiente hospitalario, esa especie ya ha sido aislada de agua corriente, piletas, respiradores, catéteres de succión, monitores de presión arterial, equipamiento de diálisis y ocasionalmente, de las manos de profesionales de salud12. Actualmente la S. maltophilia se considera un patógeno emergente, pues está ocupando un papel importante en el escenario de las infecciones hospitalarias, siendo responsable por elevada morbilidad y letalidad, por causa de su intrínseca resistencia a la mayoría de los antibióticos disponibles12.

La Morganella morganii fue aislada de O. serratus y C. coronator que fueron colectados en los puntos de colecta de Terra-Firme y Curió-Utinga, respectivamente. Presentó menos de 2% de frecuencia del total de cepas aisladas. Se trata de un bacilo Gram negativo, que puede ocurrir naturalmente en el suelo y heces de animales y del hombre. Estudios recientes de Kara José et al27, colocaron M. morganii como un importante contaminante de soluciones oftálmicas, y puede provocar inflamaciones oculares.

Las especies de Klebsiella oxytoca y Klebsiella pneumoniae fueron aisladas de C. venezuelensis y A. aegypti, respectivamente. Ambas tuvieron menos de 2% de frecuencia en los culícidos analizados, pero son importantes por estar involucradas en infecciones graves y por ser resistentes a varios antibióticos. La K. pneumoniae es un bacilo Gram negativo de la familia Enterobacteriaceae, pudiendo ser encontrada en tracto respiratorio alto y tracto gastrointestinal y urinario, causando neumonía lobar, infección urinaria y septicemia. Varios fueron los estudios que hicieron pruebas de la sensibilidad de las cepas de K. pneumoniae a los antibióticos. Menezes et al36 constató que el fármaco Meropenem es una buena elección para tratar las infecciones provocadas por esa bacteria. Ya la K. oxytoca es más oportunista, puede agravar casos y provocar bacteriemia luego de la realización de procedimientos invasivos7.

La Cedecea neteri presentó menos de un 2% del total de cepas identificadas, fueron aisladas de Mansonia titillans del punto de colecta de Curió-Utinga y de Culex quinquefasciatus del punto de colecta de Cremação. Las enterobacterias del género Cedecea se caracterizan como bacilos cortos, poseen reacciones bioquímicas semejantes a las del género Serratia. Descritas en 1981, tienen importancia patogénica todavía no bien definida, el género Cedecea abarca las especies C. davisae, C. neteri y C. lapagei, y dos especies todavía no nombradas. En humanos, es aislada en cerca de 50% de los casos de infección en el tracto respiratorio. Hay pocos relatos de bacteriemia en humanos causada por C. neteri, siendo el género Cedecea un agente oportunista raro39.

Proteus mirabilis representó menos del 1% del total de cepas identificadas, fue aislado de A. aegypti capturados en el punto de colecta de Tapanã. A pesar de haber sido poco aislado en este estudio, P. mirabilis es una de las especies más importantes clínicamente, siendo responsable por 10% de infecciones del tracto urinario no complicadas, además de ser el quinto patógeno responsable por infecciones urinarias hospitalarias. Puede causar infecciones de heridas y sepsis en pacientes hospitalizados.

 

CONCLUSIÓN

Los resultados de este estudio evidencian una relación importante entre culícidos y bacterias, lo que posibilita la manutención de un reservorio natural de bacterias que colonizan el hombre y animales, extremamente diversificado y dinámico en términos de dispersión, además, revelan la importancia de estudios ecológicos y epidemiológicos involucrando bacterias y sus vectores.

En los últimos diez años hubo un aumento en la producción científica de la temática entre insectos y bacterias. Los trabajos realizados son puntuales, pero esos esfuerzos son importantes para el avance del conocimiento y la consolidación de una línea de investigación emergente.

El presente trabajo es el primero desarrollado en América del Sur que trata del transporte de bacterias en insectos de la familia Culicidae, por eso sirve de base para la profundización de las investigaciones sobre las relaciones de estos dos grupos de seres vivos de importancia médica y veterinaria.

 

AGRADECIMIENTOS

A Nazaré Segura y Hamilton Monteiro de la Sección de Arbovirología del IEC, por su contribución técnica en la identificación de los culícidos.

A José Caetano y Maria Odete de la Sección de Bacteriología del IEC, por el apoyo y soporte en la identificación de las bacterias.

A Rosimeire Trindade y Smith Santos del Museo Paraense Emílio Goeldi, por la contribución en la realización de las colectas de los culícidos.

Al Museo Paraense Emílio Goeldi e IEC, por la infraestructura y apoyo técnico para la elaboración de las diversas etapas de esta investigación.

 

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Correspondência / Correspondence / Correspondencia
Willy Cristiano Luz Alves
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Recebido em / Received / Recibido en: 31/7/2009
Aceito em / Accepted / Aceito en: 25/9/2009

 

 

*Parte de la disertación al curso de "Mestrado em Saúde, Sociedade e Endemias da Amazônia", Universidade Federal do Pará, Brasil.