ARTÍCULO ORIGINAL

Resistencia al ayuno de Rhodnius stali Lent, Jurberg & Galvão, 1993 (Hemiptera, Reduviidae, Triatominae) en condiciones de laboratorio

Solange Ribeiro Peixoto Cailleaux; Vanda Cunha; Sergio Verly; Valdir Dias Lamas Junior; José Jurberg

Laboratório Nacional e Internacional de Referência em Taxonomía de Triatomíneos, Instituto Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, Rio de Janeiro, Brasil

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Título original: Resistência ao jejum de Rhodnius stali Lent, Jurberg & Galvão, 1993 (Hemiptera, Reduviidae, Triatominae) em condições de laboratório. Traducido por: Lota Moncada

RESUMEN

El objetivo de este estudio es evaluar la capacidad de resistencia a la privación alimentaria de Rhodnius stali Lent, Jurberg, & Galvão, 1993, en condiciones de laboratorio bajo temperatura y humedad ambiental media registrada. Huevos recién puestos, de parejas previamente separadas, se transfirieron a tubos de polipropileno con tapa de rosca, y capacidad para 50 mL, forrados con papel filtro y, en su interior, fue colocada una tira del mismo papel doblada, para aumentar el área de contacto de los insectos y remover el exceso de humedad. A seguir, los especímenes fueron individualizados, identificados y luego de la eclosión, observados hasta su muerte después de una única alimentación. El promedio de resistencia a la privación alimentaria observada, en días, fue de 23,45 ± 6,42; 40,52 ± 22,57; 70,39 ± 38,46; 119,6 ± 51,44 y 160,0 ± 49,44 para los estadios del 1^o al 5^o, respectivamente, mientras que las formas adultas resistieron 52,65 ± 12,16 días, los machos y 46,50 ± 18,05 días las hembras.

Palabras-clave: Triatominae; Insectos vectores; Privación de alimentos; Enfermedad de Chagas.

INTRODUCCIÓN

Rhodnius stali Lent, Jurberg & Galvão, 1993 fue originariamente descrita con base en 21 ejemplares machos y un ejemplar hembra, provenientes de la Provincia de Chaparé, en Bolivia, el 12 de setiembre de 1945¹. El material tipo se encuentra depositado en la Colección de Triatomíneos (Colección Herman Lent) del Instituto Oswaldo Cruz, con registro de origen de n^o 645.

Rhodnius stali fue identificada como una especie críptica, entro los ejemplares colectados e identificados equivocadamente como Rhodnius pictipes Stal, 1872, através del análisis morfométrico de la cabeza y comparativo de las estructuras fálicas, que mostraron similitudes con la presencia de un soporte del falosoma (Sph) y un proceso del pigóforo (PrP) bífido, estructuras que las demás especies del género Rhodnius no poseen, lo que llevó a situarlas en el complejo "Rhodnius pictipes" y suponer que eran los "eslabones de conexión" entre los Rhodniini y los Triatomini^1,2,3.

Las especies de Triatomíneos consideradas de importancia epidemiológica son aquellas capaces de colonizar habitaciones humanas⁴ y, de las 141 especies de triatomíneos actualmente reconocidas y distribuidas en 18 géneros, solamente algunas atienden a esta definición, entre ellas: R. prolixus Stal, 1859⁵, T. infestans Klug, 1834; T. infestans infestans Galvão, Carcavallo, Rocha & Jurberg, 2003, T. brasiliensis Neiva, 1911; T. dimidiata Latreille, 1821 y Panstrongylus megistus Burmeister, 1835⁶. Estas especies son las responsables por más de 80% de los casos de la enfermedad de Chagas en las regiones endémicas. No obstante, varias especies silvestres pueden ocasionalmente   invadir   las   habitaciones   humanas, atraídas por la luz o por la escasez de alimento en el ambiente natural degradado por la acción antrópica. La mayoría de las veces, la colonización se inicia de forma peridomiciliar, en los criaderos de animales domésticos que terminan por servir de fuente alimentaria para esos insectos.

El asentamiento de poblaciones en regiones degradadas por el hombre contribuyó a la domicialización de esta especie. Este hecho, aliado a la utilización de hojas de palmeras para cobertura de las construcciones habitacionales y a la acumulación de leña próxima a las casas, facilita la invasión de esa especie en habitat domiciliario. Rhodnius stali es, probablemente, una de las especies responsables por la transmisión de la enfermedad de Chagas entre las comunidades indígenas en Bolivia⁷, presentando infección natural por Tripanossoma cruzi⁸, conforme relatado por Tibayrenc & Le Pont, en 1984, quienes, no obstante, no consideraron esa región como endémica para la enfermedad de Chagas. La dispersión pasiva posibilita la propagación de esta especie por la interferencia con el medio ambiente, ocasionada por la acción del hombre, facilitando la emergencia de la enfermedad de Chagas en áreas con reservorios susceptibles no endémicos⁹.

Los triatomíneos bolivianos R. stali, Triatoma sordida, Stal, 1859; T. guasayana Wygodzinsky & Abalos, 1941; Panstrongylus rufotuberculatus Champion, 1899; Eratyrys mucronatus Stal, 1859; y Panstrongylus megistus Burmeister, 1835, se clasifican epidemiológicamente como candidatos vectores, por ser especies comúnmente encontradas en medio silvestre, que, sin embargo, invaden ocasionalmente ecótopos artificiales, en donde forman pequeñas colonias¹⁰.

La resistencia prolongada a la privación alimentaria constituye una importante estrategia de supervivencia de estos insectos, una vez que, en situaciones adversas o de privación alimentaria por diversos factores, son capaces de sobrevivir por largos períodos. Así, el presente trabajo tuvo como foco principal de estudio establecer el período de resistencia a la privación alimentaria en laboratorio de Rhodnius stali en todos los estadios de vida, a partir de la eclosión, con una única alimentación en las fases inmaduras y adultas, bajo temperatura y humedad ambiental media registrada en el Laboratorio Nacional e Internacional de Referencia en Taxonomía de Triatomíneos del Instituto Oswaldo Cruz.

MATERIAL Y MÉTODOS

Con el objetivo de ampliar los conocimientos sobre esta especie, el estudio en cuestión agrega parámetros biológicos de las observaciones diarias del período comprendido entre enero y octubre de 2009, en el Insectario del Laboratorio Nacional e Internacional de Referencia en Taxonomía de Triatomíneos del Instituto Oswaldo Cruz.

Los ensayos de resistencia a la privación alimentaria fueron iniciados con ejemplares que formaron la colonia en el Laboratorio Nacional e Internacional de Referencia en Taxonomía de Triatomíneos, provenientes del Municipio de Alto Beni, Departamento de La Paz, Provincia de Caranavi, Bolivia.

Una nueva colonia se inició en setiembre de 2009, constituida por dos machos y cinco hembras para apareamiento, de los que se obtuvieron los huevos, para dar inicio a la observación de la resistencia a la privación alimentaria. Se observó diariamente la puesta de los huevos, y los huevos retirados fueron fechados, separados y almacenados en tubos de polipropileno con capacidad para 50 mL, forrados con papel filtro. Luego de la eclosión, los ejemplares de 1^o estadio se separaron en frascos, individualizados, fechados, registrados y alimentados con sangre de ratones (Mus musculus) siendo observados diariamente hasta su muerte. Para obtener los ejemplares del 2^o estadio, fueron separadas ninfas de 1^o estadio que fueron alimentadas semanalmente con ratones Mus musculus, inmovilizados y anestesiados, conforme el protocolo de número L-081-08, aprobado por el Comité de Ética en el Uso de Animales (CEUA-Fiocruz), hasta su ecdisis al 2^o estadio y, a seguir, colocados en recipientes, siguiéndose el mismo procedimiento anteriormente descrito para observar su resistencia a la privación con una única alimentación. Los demás estadios siguieron el mismo protocolo.

Se observaron 533 ejemplares de R. stali, siendo:93 del 1^o al 5^o estadio, 34 machos y 34 hembras. En el decurso de los ensayos, se observaron los siguientes valores en relación al promedio ambiental de temperatura y humedad: Temperatura mínima de 18,74^o C; máxima, de 25,23^o C y humedad relativa (UR) de 65,3%, registradas con termohigrómetro testo 608-H1, en el Insectario de Triatomíneos del Laboratorio Nacional e Internacional de Referencia en Taxonomía de Triatomíneos del Instituto Oswaldo Cruz. Los resultados fueron analizados estadísticamente con la prueba T no pareada, considerando SDs iguales (unpaired †, population with equal SDs) en el programa Graph Instart 3.10.

RESULTADOS

Se observó que el mayor tiempo de supervivencia a la privación alimentaria ocurrió en el 5^o estadio, con 160.0 ± 49.44 días, siguiendo en orden decreciente, el 4^o estadio, con 119.6 ± 51.44 días; el 3^o estadio, con 70.39 ± 38.46 días; el 2^o estadio, con 40.52 ± 22.57 días y, por último, el 1^o estadio, con 23.45 ± 6.42 días, demostrando que la resistencia a la privación alimentaria está vinculada a las reservas nutricionales acumuladas del 1^o al 5^o estadios. En contraposición, el período medio de sobrevida en la fase adulta fue menor 52,65 ± 12.16 días para machos y 46,5 ± 18.05 días para hembras cuando comparados con el 3^o, 4^o y 5^o estadios. (Tabla 1).

DISCUSIÓN

Como sucede en cualquier enfermedad emergente y zoonótica, la enfermedad de Chagas está directamente influenciada por los cambios climáticos ocasionados por el calentamiento global y por el uso irrestricto de los recursos naturales por el hombre y, así, cualquier degradación de los biótopos silvestres, acarrea cambios en su diversidad, contribuyendo para su diseminación¹¹.

Más de 130 especies de Triatomíneos fueron descritas como potenciales vectores del T. cruzi en América del Sur, además de que más de 100 reservorios salvajes fueron relatados, siendo que el proceso de globalización fue uno de los factores que más influyó en este cuadro de la ampliación de nuevos vectores, que se suman al Triatoma infestans, que permanece como principal vector de la enfermedad de Chagas en las ciudades de América del Sur, principalmente en Bolivia¹².

Resultados comparativos de resistencia al ayuno de diferentes Triatomíneos, realizado por Cortéz y Gonçalves¹³, en 1998 y adaptado por Cailleaux et al, demostraron que la diferencia de condiciones de temperatura, humedad y fuente alimentaria dificultan la comparación de los resultados (Tabla 2).

Rhodnius stali resiste a prolongados períodos de ayuno. Las ninfas del 1^o estádio son más sensibles a la privación de alimentos, mientras que el 5^o estadio es la fase en la que hubo más resistencia al ayuno prolongado.

La resistencia a la privación alimentaria de Rhodnius stali observado en temperatura promedio ambiental registrada fue menor cuando comparado con Rhodnius prolixusu, que obtuvo un resistencia al ayuno en el 1^o estadio de 44,64 ± 10.83 días; en el 2^o estadio, de 91 ± 15.56 días; en el 3^o estadio, de 164.90 ± 25.99 días; en el 4^o estadio, de 161.60 ± 43.47 días; y 114.75 ± 25.97 días en el 5^o estadio, en condiciones ambientales de laboratorio con temperatura de 24,2^o C y UR de 73% alimentado con sangre de ave; menor que Rhodnius neivaiu^17,18 que presentó una resistencia de 41.9 ± 10.7 días en el 1^o estadio, 84.6 ± 15.7 días en el 2^o estadio, 142.3 ± 17.6 días en el 3^o estadio, 149.7 ± 21.8 días en el 4^o estadio, 106.3 ± 19.5 días en el 5^o estadio, 86.5 ± 19.8 días para los ejemplares hembras y 84.3 ± 16.6 días para los ejemplares machos, observados en temperatura controlada de 28 ± 2^o C y UR de 75 ± 10% alimentados con sangre de gallina y también menor cuando R. neivai fue alimentado con sangre de conejo en las mismas condiciones ambientales, observándose para el 1^o estadio una resistencia al ayuno de 37.6 ± 8.4 días, 79.4 ± 13.8 días no 2^o estadio, 124.9 ± 18.5 días no 3^o estadio, 131.6 ± 17.2 días en el 4^o estadio, 99.1 ± 20.1 días en el 5^o estadio, 83.9 ± 24.7 días para los ejemplares hembras y 79.5 ± 21.4 días para los ejemplares machos¹⁸. Sin embargo, la resistencia al ayuno de R. stali fue mayor del 1^o al 5^o estadio y para los ejemplares machos cuando comparada con la resistencia al ayuno de Rhodnius neglectus, con resistencia de 13.0 días para el 1^o estadio, 22.0 días en el 2^o estadio, 30.5 días en el 3^o estadio, 41.0 días en el 4^o estadio, 66.5 días en el 5^o estadio y 51.5 días para los ejemplares machos, apenas en los ejemplares hembras, la resistencia fue menor con 57.5 días en temperatura controlada de 26^o C y UR de 75%^19,20.

Bajo las condiciones experimentales del presente estudio Rhodnius stali se mostró capaz de resistir a la privación de alimento por hasta cinco meses en el 5^o estadio, en temperatura media ambiental registrada en el Insectario del Laboratorio Nacional e Internacional de Referencia en Taxonomía de Triatomíneos del Instituto Oswaldo Cruz.

CONCLUSIÓN

R. stali es capaz de sobrevivir por largos períodos a la privación de alimento, hasta 277 días en el 5^o estadio, lo que, aliado a su capacidad de adaptación en ambiente domiciliar y a su comportamiento de abrigarse en los retiros, protegidos de la acción de los insecticidas en áreas con interferencia antrópica, propicia su perpetuidad en ambientes desfavorables en lo que concierne a la alimentación, a la temperatura y a la humedad.^{5,20,21,22,23}. Esta conclusión coincide con los datos obtenidos por otros autores en relación a otras especies del género.

AGRADECIMIENTOS

Al técnico Airton Jarbas Pereira. Al Consejo Nacional de Desarrollo Científico y Tecnológico (CNPq) y Servicio de Vigilancia en Salud (SVS).

REFERENCIAS

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Recebido em / Received / Recibido en:12/8/2011
Aceito em / Accepted / Aceito en:18/10/2011