2- RESUMOS DE TRABALHOS APRESENTADOS NA
I CONFERÊNCIA QTROP/FAP SOBRE A TUBERCULOSE - 2002

Utilização do fosfato trissódico como agente descontaminante de escarro no MB/BacT para o diagnóstico da tuberculose pulmonar

Angela Barreto; Leda Santos; Joselba Araújo; Reginalda Medeiros; Paulo Caldas; Carlos Campos; Fátima Martins

Laboratório de Tuberculose/Centro de Referência Prof. Hélio Fraga/CENEPI/FUNASA/MS

O sistema MB/BacT desenvolvido pela Organon Teknika para o isolamento de micobactérias é totalmente automatizado e não radiométrico. Baseado no convencional meio 7H9 de Middlebrook, utiliza um sensor colorimétrico para detecção de CO₂ produzido pelo metabolismo das células. Em relação a descontaminação dos materiais clínicos para o isolamento de micobactérias, o fabricante recomenda o método da n-acetil cisteína (NALC) com hidróxido de sódio. De 1996 até o momento vários autores apresentaram resultados de comparações entre esta metodologia com outras mais tradicionais, em termos de percentual de isolamento, contaminação, tempo de crescimento utilizando o NALC ^(1-5) . Carricajo et al. (2001) utilizaram lauryl sulfato de sódio como agente descontaminante, com bons resultados neste sistema. O objetivo deste trabalho foi avaliar o fosfato trissódico como agente descontaminante para o método automatizado MB/BacT. Foram examinadas 346 amostras de escarro de pacientes com suspeita clinica de tuberculose, da nossa rotina de laboratório de referência, no ano de 1999. Os escarros foram descontaminados pelo Método de Corper & Stoner modificado, que utiliza fosfato trissódico a 23% como agente descontaminante em contato com o mesmo volume de escarro durante 24 horas e fosfato monossódico a 20% como agente neutralizante vol/vol. O material tratado foi semeado em tubos com meio de Lowenstein Jensen - LJ (padrão ouro) e em frascos com meio de cultura do sistema MB/BacT. Os frascos desse sistema foram monitorados a cada 10 minutos, quanto ao crescimento, e as culturas em LJ, semanalmente. A identificação de M. tuberculosis foi feita através do crescimento em PNB e TCH (agentes inibidores). O resultado final apresentados pelas semeaduras em ambos os meios foi registrado após 6 semanas de incubação a 35-37^oC.

Os dados obtidos, apresentados na tabela abaixo, permitem avaliar o desempenho do método em termos de: sensibilidade - 93% ( 86,5 - 97,1 ), especificidade - 97,5% ( 94,4 - 99,0) e de valores preditivos de positividade enegatividade - 94% ( 87,6 - 97,7) e 97,11% (93,8 - 98,7) respectivamente, com o intervalo de confiança de 95%. O tempo médio para detecção no MB/BacT foi de 19 dias e nenhuma contaminação foi observada neste experimento, contrastando com experimentos preliminares usando o método do NALC onde a contaminação foi muito além daquela tolerada ( > 5%). Estes dados mostram que a metodologia de descontaminação empregada neste sistema não causou a inibição do crescimento das células, permitindo um bom isolamento. O MB/BacT demonstrou boa acurácia e que pode ser utilizado na rotina de laboratórios clínicos para o diagnóstico da tuberculose pulmonar.

Referências bibliográficas

1. Benjamin Jr., WH, Waites, KB, Gibbs, L, Waller, M, Nix,S, Moser,.SA, Willert, M. 1998. Comparison of the MB/BacT with a revised antibiotic supplement Kit to the BACTEC 460 system for detection of mycobacteria in clinical specimens. J.Clin.Microbiol.36 (11): 3234-3238.

2. Brunelo, F, Favari, F & Fontana, R. 1999. Comparison of the MB/BacT and BACTEC 460 TB systems for recovery of mycobacteria from various clinical specimens. J.Clin.Microbiol. 37(4):1206-1209.

3. Carricajo, A, Fonsale, N, Vautrin, AC, Aubert, G. 2001. Evaluation of BacT/Alert 3D liquid culture system for recovery of mycobacteria from clinical specimens using sodium dodecyl (lauryl) sulfate-NaOH decontamination. J Clin. Microbiol. 39(10): 3799-3800.

4. Moreno, R, Garcia del Busto, A, Pardo, F, Galiano, JV, Sabater, S, Hemandez, I. 1999. Evaluation an automatic system (MB/BacT) for the isolation of Mycobacterium spp. Enferm.Infecc.Microbiol.Clin. 17(3):126-129.

5. Palhares, MCA, Vasconcelos, GMA, Bocalon, RAL, Telles, MAS, Ueki, SYM. 1999. Automação em micobactérias: comparativo em serviço de atendimento à pacientes HIV positivo. XX Congresso Brasileiro de Microbiologia.

6. Roggenkamp, A, Hornef, MW, Masch, A, Aigner, B, Auterieth, IB, Heesemann, J. 1999. Comparison of MB/BacT and the BACTEC 460 TB systems for recovery of mycobacteria in a routine diagnostic laboratory. J.Clin.Microbiol. 37(11):3711-3712.

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