Detecção de bactérias enteropatogênicas e enteroparasitas em pacientes com diarreia aguda em Juruti, Pará, Brasil

Detection of enteropathogenic bacteria and enteroparasites in patients with acute diarrhea in Juruti, Pará, Brazil

La detección de bacterias enteropatógenas y enteroparasitarias en los pacientes con diarrea aguda en Juruti (Pará, Brasil)

Edvaldo Carlos Brito Loureiro; Cintya Oliveira Souza; Eveline Bezerra Sousa; Daniel Vasconcelos Santos; Daniela Cristiane da Cruz Rocha; Francisco Lúzio de Paula Ramos; Mônica Cristina Moraes Silva

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RESUMO

Com o intuito de determinar a frequência de bactérias enteropatogênicas e enteroparasitas em pacientes com diarreia aguda no Município de Juruti, Pará, o qual passa por intenso processo imigratório face o grande projeto de exploração mineral, avaliaram-se 263 casos de diarreia aguda, dos quais 19% foram atribuídos a bactérias enteropatogênicas, destacando-se a Shigella spp., que representou 13,7%. Salmonella spp., Aeromonas spp. e Plesiomonas shigelloides também foram detectados. Os sorotipos de Shigella mais frequentemente encontrados foram S. flexneri (61,1%) e S. sonnei (38,9%). Entre as Salmonella, identificaram-se os seguintes sorotipos: S. Panama (2), S. Newport (2), S. Bredeney, S. Saintpaul e S. Gaminara. A infecção pelos protozoários alcançou 85,3% tendo como principais responsáveis, por ordem de frequência, Blastocystis hominis (37,3%), Entamoeba histolytica/E. dispar (22,8%), Endolimax nana (16,7%), Entamoeba coli (9,5%) e Giardia lamblia (8,4%). Esses resultados fornecem valiosos subsídios à vigilância epidemiológica e ambiental, demonstrando as condições insatisfatórias de saneamento básico em que vive a população do Município.

Palavras-chave: Diarreia; Enterobacteriaceae; Enteropatias Parasitárias; Infecções por Protozoários.

ABSTRACT

Keywords: Diarrhea; Enterobacteriaceae; Intestinal Diseases, Parasitic; Protozoan Infections.

RESUMEN

Con el objetivo de determinar la frecuencia de bacterias enteropatógenas y de enteroparásitos en pacientes con diarrea aguda en el Municipio de Juruti, Pará, que pasa por intenso proceso migratorio delante de un gran proyecto de explotación mineral, se evaluaron 263 casos de diarrea aguda, de los cuales un 19% fueron atribuidos a bacterias enteropatogénas, destacando la Shigella spp., que representó un 13,7%. También fueron detectadas Salmonella spp., Aeromonas spp. y Plesiomonas shigeloide. Los serotipos de Shigella más frecuentemente encontrados fueron S. flexneri (61,1%) y S. sonnei (38,9%). Entre las Salmonella, se identificaron los siguientes serotipos: S. Panama (2), S. Newport (2), S. Bredeney, S. Saintpaul y S. Gaminara. La infección por protozoarios alcanzó un 85,3% teniendo como principales responsables, por orden de frecuencia, a Blastocystis hominis (37,3%), Entamoeba histolytica/E. dispar (22,8%), Endolimax nana (16,7%), Entamoeba coli (9,5%) y Giardia lamblia (8,4%). Esos resultados ofrecen valiosos subsidios a la vigilancia epidemiológica y ambiental, demostrando las malas condiciones de saneamiento básico en las que vive la población del Municipio.

Palavras clave: Diarrea; Enterobacteriaceae; Parasitosis Intestinales; Infecciones por Protozoarios.

INTRODUÇÃO

As doenças diarreicas são responsáveis por cerca de 2,5 milhões de mortes, anualmente, de crianças menores de 5 anos de idade, a maioria de países em desenvolvimento¹². O desmame precoce, o baixo nível educacional e as más condições de saneamento ambiental são fatores predisponentes para a doença diarreica³³.

Dentre as causas infecciosas de diarreia incluem-se vírus, bactérias e protozoários, sendo os principais agentes etiológicos: rotavírus, calicivírus, astrovírus, Escherichia coli diarreiogênicas, Shigella spp., Salmonella spp., Entamoeba histolytica, Giardia lamblia, Cryptosporidiumparvum e Cyclospora cayetanensis^{10,22,28,29,32}.

A maioria das diarreias bacterianas requer medidas de intervenção voltadas apenas à aplicação da correção de sintomas e do desequilíbrio hidroeletrolítico. Porém, vale ressaltar que um caso de diarreia pode suscitar medidas de vigilância epidemiológica, face à possibilidade do envolvimento de agentes potencialmente epidêmicos como o V. cholerae O1²⁷, além de nortear medidas terapêuticas para interromper a cadeia de transmissão, como na cólera, ou para reduzir ou evitar os riscos de complicações determinadas por bactérias virulentas como a Shigella e S. Typhi^6,17.

Algumas enteroparasitoses têm importância relevante na patogênese da diarreia, e vários estudos têm associado a Giardia lamblia, o Crypstosporidium sp. e a Entamoeba histolytica com a doença^21,25,30,3. A transmissão das parasitoses intestinais se estabelece de maneira fácil e contínua, principalmente nos países em desenvolvimento, onde o crescimento populacional não é acompanhado da melhoria das condições de vida da população²⁶, tornando-se um problema permanente de saúde pública.

Informações da Secretaria Municipal de Saúde (SEMSA) de Juruti, Pará, dão conta que a diarreia constitui um dos principais agravos da população, devido à falta de infraestrutura no saneamento básico e no abastecimento de água potável²³. Ali pouco se conhece sobre as causas da doença diarreica, devido à carência de pessoal técnico qualificado e dos métodos adequados de diagnóstico. Assim, o objetivo do estudo foi conhecer a relação dos enteropatógenos bacterianos e parasitários nas diarreias agudas no Município de Juriti, Pará.

MATERIAIS E MÉTODOS

Foram selecionados para o estudo 332 pacientes, sendo 286 (86%) provenientes da área urbana e os demais da rural. Do total, 263 pacientes apresentavam diarreia aguda (casos: três ou mais evacuações/dia) e 69 não tinham diarreia (controles: ausência de diarreia nos últimos 15 dias). Os sujeitos foram constituídos de crianças e adultos atendidos em três unidades de saúde do Município de Juruti. Os pacientes ou seus responsáveis assinaram um termo de consentimento livre e esclarecido autorizando sua participação no estudo. O presente trabalho, sob protocolo n^o 030/05, CAAE: 0013.0.072.000-06, foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa do Instituto Evandro Chagas (IEC).

O exame parasitológico foi procedido sob microscopia de luz para pesquisa de formas evolutivas de protozoários e helmintos, utilizando os métodos diretos (salina/Lugol) e sedimentação espontânea⁵.

Para o isolamento de bactérias enteropatogênicas, o material fecal em suspensão foi semeado em meios seletivos indicadores (ágar Mac Conkey – MC, ágar Salmonella-Shigella – SS, ágar Tiossulfato Citrato Bile Sacarose – TCBS) e em meios de enriquecimento (Selenito Cistina e Água Peptonada Alcalina – APA, pH 8,5). As colônias suspeitas foram submetidas aos meios de triagem: Triple sugar iron –TSI e Kligler iron ágar (KIA). As caracterizações bioquímicas foram realizadas pelo método convencional e Sistema API-20E (bioMérieux)¹⁴ e as sorológicas segundo recomendações de Ewing⁸ e Kauffmann¹¹.

Categorias patogênicas de Escherichia coli: EPEC-E. coli enteropatogênica, ETEC-E. coli enterotoxigênica, STEC-E. coli produtora de toxina de Shiga e EIEC-E. coli enteroinvasora, foram pesquisadas por meio da determinação de genes de virulência, utilizando-se primers específicos de cada fator de virulência para realização da reação em cadeia mediada pela polimerase (PCR)^{7,9,18,20,31,34}.

RESULTADOS

Os resultados estão apresentados na tabela 1, mostrando que, dos 263 casos de diarreia aguda, 50 (19%) apresentavam enteropatógenos bacterianos. Destes, 36 (13,7%) são representados por Shigella spp., sete (2,7%) por Salmonella spp. 6 (2,2%) por Aeromonas spp. e 1 (0,4%) de P. shigelloides. Considerando as infecções pelos parasitas, convém destacar a associação entre dois ou mais parasitas em 88 pacientes (33,5%), em relação aos 74 monoparasitados (28,2%). Entre os parasitas se destacam B. hominis, E. histolytica/E. dispar, E. nana, Ancilostomideo e A. lumbricoides. Parasitismo por G. lamblia foi encontrado em 22 (8,4%) dos casos. Dentre as bactérias enteropatogênicas foi verificada associação em apenas uma ocasião, S. flexneri e A. sobria. O sorotipo de Shigella mais frequente foi representado por S. flexneri (61,1%) seguido de S. sonnei (38,9%). Entre as Salmonella, identificaram-se os seguintes sorotipos: S. Panama (2), S. Newport (2), S. Bredeney, S. Saintpaul e S. Gaminara. Até o momento pesquisaram-se categorias patogências de Escherichia coli em 35 pacientes com diarreia aguda. Destes, oito estavam infectados com E. coli diarreiogências, sendo sete por E. coli enterotoxigênica - ETEC (LT + [3] e Sta [4]) e uma por E. coli enteropatogênica - EPEC atípica.

Quando comparamos os resultados entre diarreicos e os controles, observa-se que a frequência de agentes bacterianos é maior nos diarreicos, com destaque para o gênero Shigella spp. Dentre os parasitas, esta diferença não foi observada; no entanto, destaca-se a frequência de E. histolytica/E. dispar e G. lamblia (Tabela 2).

DISCUSSÃO E CONCLUSÃO

No cômputo geral, bactérias enteropatogênicas representaram 19% dos casos de diarreia avaliados, sendo o gênero Shigella o mais frequente, com destaque para S. flexneri e S. sonnei, que têm sido as espécies mais frequentemente detectadas no Brasil². Dos patógenos bacterianos considerados emergentes¹⁶, Aeromonas e Plesiomonas foram identificados entre os casos de diarreia aguda. Cinco sorovares de Salmonella foram identificados dentre os casos diarreicos e nenhum caso de S. Typhi ou Vibrio foi encontrado. Mesmo assim, convém destacar a importância da pesquisa de S. Typhi, agente da febre tifoide, doença de notificação compulsória responsável por epidemias em diversos municípios do Estado do Pará²⁴.

A importância das E. coli "diarreiogênicas" nos casos diarreicos tem sido demonstrada por diferentes autores^28,2,19, e a evidência de sua ocorrência no Estado do Pará, conforme constatado nesse estudo, mostra sua ampla distribuição e consolida sua importância em saúde pública.

Verifica-se uma importante participação dos parasitas nos processos entéricos na população de Juruti. Grande diversidade de protozoários e helmintos foi observada entre os pacientes com diarreia, sendo a E. histolytica/E. dispar e B. hominis os mais frequentes, apesar deste último ser atualmente de patogenicidade discutida¹. No Brasil, a participação dos protozoários como agentes responsáveis por diarreias agudas tem sido relatada por alguns autores^25,30. Como esperado, a faixa etária de 1 a 4 anos teve maior número de indivíduos parasitados, seguida por aqueles com idade entre 5 e 10 anos, corroborando os dados da literatura¹³.

Os resultados encontrados fornecem subsídios importantes à vigilância epidemiológica e ambiental, demonstrando que a população se encontra sob potencial risco de desenvolver doença diarreica em função das precárias condições de saneamento básico em que vive.

A continuidade das avaliações deste estudo, associada às futuras análises moleculares para pesquisa de categorias patogênicas de E. coli, à pesquisa de rotavirus, bem como à pesquisa de antígenos para G. lamblia, E. histolytica e Cryptopsoridium sp. poderão oferecer dados reais da participação destes patógenos na etiologia das doenças diarreicas nesse Município.

Ressalte-se que a presença marcante de enteropatógenos na população de Juruti, Pará, inclusive com a ocorrência de agentes emergentes, somada ao elevado movimento imigratório face à implantação de projeto de grande envergadura, que ora ocorre na região, denota a necessidade de se manter um serviço permanente de vigilância no tocante aos agentes causadores de diarreia, sobretudo os bacterianos, inclusive pelo elevado potencial epidêmico de alguns deles.

Aos profissionais do Instituto Evandro Chagas: Bruno Lima, Cláudia Nascimento, Dolores Santos, José Caetano Silva, José Góis dos Santos, Madalena Lobato, Maria da Paz Mesquita, Maria do Socorro Garcez, Maria Odete Arouche, Raimundo Nonato Araújo, Patrícia Yoshida e Suely Pacheco, pelo apoio técnico e administrativo. Aos profissionais da Secretaria de Saúde do Município de Juruti e Alcoa/Omnia S.A., pelo apoio por ocasião das atividades de campo. Financiamento: Alcoa/Omnia S.A.; CNPq- 403323.2005.3 e IEC/SVS/MS.

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Recebido em / Received / Recibido en: 31/7/2009
Aceito em / Accepted / Aceito en: 25/9/2009